表达鸡Ⅱ型干扰素重组鸡痘病毒的构建及其特性分析

文献类型: 中文期刊

第一作者: 孙永科

作者: 孙永科;王云峰;智海东;刘胜旺;王玫;童光志

作者机构:

关键词: 鸡IFN-Ⅱ基因;重组鸡痘病毒

期刊名称: 农业生物技术学报

ISSN: 1006-1304

年卷期: 2005 年 13 卷 01 期

页码: 85-89

收录情况: CSCD

摘要: 将鸡Ⅱ型干扰素(ChIFNγ)基因插入到鸡痘病毒转移载体pSY681中,获得重组转移载体pSY681-ChIFNγ。将pSY681-ChIFNγ转染已感染亲本鸡痘病毒S-FPV-017株的鸡胚成纤维细胞,使其在鸡胚成纤维细胞内与鸡痘病毒基因组发生同源重组,产生表达ChIFNγ的重组鸡痘病毒rFPV-ChIFNγ。在含有X-gal的营养琼脂培养基上进行蓝斑筛选,通过PCR和间接免疫荧光等实验证实获得纯化的、表达ChIFNγ的重组鸡痘病毒。将在鸡胚成纤维细胞中培养72h的rFPV-ChIFNγ上清接种小鼠成纤维细胞(L929),通过细胞病变抑制实验证明重组ChIFNγ具有抑制水疱性口炎病毒复制的活性,培养上清的抗病毒效价为2048U/mL。

分类号: S852.65

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