小反刍兽疫病毒N蛋白原核表达条件的优化及反应活性

文献类型： 中文期刊

第一作者： 苗书魁

作者： 苗书魁;汪萍;魏玉荣;陆桂丽;米晓云;夏俊;沙依兰·卡依扎;魏婕;王延;李金娜;马文戈;黄炯

作者机构：

关键词： 小反刍兽疫病毒;N蛋白;原核表达;反应活性

期刊名称： 中国微生态学杂志

ISSN： 1005-376X

年卷期： 2019 年 01 期

页码： 30-34

收录情况： CSCD

摘要： 目的探讨小反刍兽疫病毒(Peste des Petits Ruminants Virus,PPRV)N蛋白原核表达、条件优化及反应活性。方法参照GenBank中PPRV (Nigeria/75/1)N基因序列,人工合成该基因,构建重组表达质粒pET-30a (+)-N,转化至BL21 (DE3)感受态细胞,IPTG诱导表达,进行SDS-PAGE电泳、Western-blot分析。在不同温度、时间、IPTG浓度条件下诱导表达N蛋白,确定最佳表达条件。结果 PPRV N蛋白(64.4kD)成功表达,能被羊PPRV免疫血清所识别。N蛋白主要以包涵体存在,其最佳诱导条件:诱导温度28℃、IPTG终浓度2.0mmol/L、诱导时间16h。结论原核表达的PPRV N蛋白具有良好的特异性和反应活性,为单克隆抗体的制备及快速诊断方法的建立提供了技术资料。

分类号： S852.65

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