牛胚胎骨骼肌卫星细胞的分离、培养及诱导分化

文献类型： 中文期刊

第一作者： 边艳超

作者： 边艳超;何晓红;牧仁;李向臣;马月辉;李云章;关伟军

作者机构：

关键词： 鲁西黄牛胚胎;骨骼肌卫星细胞;增殖能力;诱导分化

期刊名称： 细胞与分子免疫学杂志

ISSN： 1007-8738

年卷期： 2013 年 29 卷 11 期

页码： 1196-1199，1204

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 目的分离培养鲁西黄牛胚胎骨骼肌卫星细胞,并研究其生物学特性。方法取30~50 d龄鲁西黄牛胚胎四肢骨骼肌,联合Ⅰ型胶原酶和胰蛋白酶及差速贴壁法分离获得骨骼肌卫星细胞,通过免疫细胞化学染色和RT-PCR检测卫星细胞表面标志desmin、MyoD、c-Met、Myf5、pax7,并研究其生物学特性。结果鲁西黄牛卫星细胞传代培养至15代以上,冻存后细胞活率为97.90%±0.96%;免疫细胞化学染色检测卫星细胞标记物desmin,MyoD呈阳性表达;RT-PCR检测desmin、c-Met、Myf5、pax7呈阳性表达;克隆形成率为56.39%±1.41%;染色体核型分析显示分离培养的细胞均来源于正常牛胚胎个体;通过不同的诱导剂将牛卫星细胞成功地诱导为成骨细胞和神经元样细胞,分别进行茜素红,甲苯胺蓝染色呈阳性表达,RT-PCR检测成骨细胞标记物osteopontin,Ⅰ型胶原蛋白和神经细胞标记物MAP2和nestin均呈阳性表达。结论本试验成功地分离获得了牛卫星细胞,并具有自我更新增殖和多向分化潜能。

分类号： R329

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