马传染性贫血病毒囊膜基因gp90V4区糖基化回复突变感染性克隆的构建

文献类型： 中文期刊

第一作者： 韩秀娥

作者： 韩秀娥;张萍;王雪峰;孔宪刚;周建华;相文华

作者机构：

关键词： 马传染性贫血病毒;N-连接糖基化;定点突变;感染性克隆

期刊名称： 中国预防兽医学报

ISSN：

年卷期： 2009 年 03 期

页码： 165-169

收录情况： CSCD

摘要： 为了阐明我国马传染性贫血病毒(EIAV)弱毒疫苗致弱及免疫保护的分子机制,本研究分析了疫苗株及其亲本强毒株共34个囊膜基因序列。结果发现疫苗株在膜基因gp90V4区潜在的N-连接糖基化位点出现了稳定的碱基替换,使该位点消失。为研究囊膜糖基化的作用,以疫苗株全长感染性克隆pLGFD3-8为亲本,利用反向遗传技术对该突变位点进行了糖基化序列回复突变操作,构建了全基因感染性克隆pLGFDg9。将其转染驴胎皮肤细胞(FDD),通过用逆转录酶活性、间接免疫荧光和RT-PCR方法检测而确定其感染性。结果表明,在FDD细胞中盲传3代后,在细胞培养物中可检测到逆转录酶活性,RT-PCR和间接免疫荧光检测均呈阳...

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