转豇豆胰蛋白酶CPTI基因棉花检测用标准分子的制备

文献类型: 中文期刊

第一作者: 王旭静

作者: 王旭静;董雷;苗猛猛;唐巧玲;王志兴

作者机构:

关键词: 标准分子;转基因棉花;定性检测;定量检测

期刊名称: 中国生物工程杂志

ISSN: 1671-8135

年卷期: 2011 年 31 卷 08 期

页码: 85-91

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 利用PCR的方法克隆豇豆胰蛋白酶基因CPTI、基因表达调控元件35S启动子、NOS终止子以及棉花内标基因Sad1,连接到克隆载体上,构建成质粒标准分子pGB。PCR检测过程中,质粒标准分子和转基因棉花中能扩增出4个目的条带,而非转基因棉花中不能扩增出相应的条带,证明构建好的质粒标准分子能用于转基因棉花的定性检测。荧光定量PCR绘制4个目的基因片段的标准曲线,各标准曲线的相关系数均达到0.985以上,说明建立的PCR具有很好的Ct值-初始浓度相关性,达到定量分析的需求,而且荧光定量PCR反应具有很好的重复性和稳定性,可用于实际样品的定量检测。

分类号: S562`Q943.2

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