一种快速、高效的大豆农杆菌转化技术

文献类型： 中文期刊

第一作者： 马丽萍

作者： 马丽萍;胡正;张保缺;张辉

作者机构：

关键词： 大豆;根瘤农杆菌;外植体;转化

期刊名称： 中国农业科学

ISSN： 0578-1752

年卷期： 2008 年 41 卷 03 期

页码： 661-668

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 【目的】拟通过改进大豆外植体的组织培养、农杆菌侵染以及植株再生等关键性环节,构建快速、高效的大豆转基因技术体系,解决外源基因难以导入大豆的难题。【方法】成熟大豆种子在环境温度25～28℃、含有1mg·L-16-苄氨基嘌呤的MSB5培养基上催芽24h。保留大豆下胚轴、胚尖及1片子叶作为外植体,并在相同条件下预培养24h。将外植体转入2/3MSB5液体培养基(1mg·L-16-苄氨基嘌呤+100μmol·L-1乙酰丁香酮+携带有Ti质粒pBI121的根瘤农杆菌GV3101)中,在28℃黑暗环境下侵染21h。侵染后的外植体在28℃黑暗条件下共培养3d。外植体经无菌水处理后移栽到灭菌土中,并在适宜条件下培养。【结果】分子检测结果表明,本研究涉及的新型外植体的再生率高达90%以上(中品661为95%,垦农18为93%,绿75为90%),转化效率明显提高;而利用子叶节和胚尖进行培养获得的外植体的再生率仅50%和70%。此外,本研究涉及的大豆转化体系省去了外植体后期繁琐、耗时的组织培养步骤,再生周期明显缩短。【结论】与前人报道的大豆遗传转化体系技术相比,本研究所使用的方法更加快速、高效,可为农杆菌介导的大豆转基因、突变体构建等基因组学研究提供强有力的技术平台。

分类号： S565.1

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