禽呼肠孤病毒σC蛋白的原核表达及多克隆抗体的制备

文献类型: 中文期刊

第一作者: 孙美玉

作者: 孙美玉;秦立廷;高玉龙;祁小乐;高宏雷;王永强;王笑梅

作者机构:

关键词: 禽呼肠孤病毒;σC基因;原核表达;兔抗血清

期刊名称: 中国家禽

ISSN: 1004-6364

年卷期: 2011 年 33 卷 12 期

页码: 18-21

收录情况: 北大核心

摘要: 通过RT-PCR扩增禽呼肠孤病毒σC基因,经EcoRⅠ和SalⅠ双酶切处理后与pET-30a原核表达载体连接,获得重组质粒pET-30a-σC。将重组阳性质粒转化至BL21(DE3)感受态细胞,经IPTG诱导表达后通过Western blot分析表明重组目的蛋白获得表达,分子量约为42ku,主要以包涵体形式存在。重组蛋白经纯化后免疫新西兰白兔,三次免疫获得抗σC蛋白的高效免疫血清。经ELISA检测,该血清抗体效价为1∶105,并且能够与重组杆状病毒表达的σC蛋白发生特异性反应。禽呼肠孤病毒σC蛋白的表达与兔抗血清的制备为进一步研究该蛋白功能奠定了基础。

分类号: S852.65

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