骨骼肌特异表达载体的构建与验证

文献类型： 中文期刊

第一作者： 于永生

作者： 于永生;曹阳;罗晓彤;张树敏

作者机构：

关键词： 合成启动子;肌肉特异表达载体;ω-3脂肪酸去饱和酶;体外验证

期刊名称： 生物技术

ISSN： 1004-311X

年卷期： 2011 年 21 卷 06 期

页码： 14-17

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 目的:构建肌肉特异性表达线虫ω-3脂肪酸去饱和酶的肌肉特异性载体,证明其表达的有效性。方法:化学合成292bp的带有肌肉特异性转录因子结合位点的DNA序列,然后与线虫ω-3脂肪酸去饱和酶基因cDNA、去除CMV启动子的表达载体pcDNA3.1连接构成肌肉特异性表达载体pcDNA3.1-SF,4w龄C57BL/6小鼠肌肉注射该重组载体,RT-PCR检测证明其表达有效性。结果:DNA测序结果证明合成的292 bp片段带有肌肉特异性表达元件;PCR鉴定显示启动子片段正确地插入到目的基因上游;RT-PCR鉴定显示肌肉内ω-3脂肪酸去饱和酶基因得到有效转录。结论:该试验为在转基因动物的肌肉中表达外源基因奠定了基础。

分类号： Q782

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