应用竞争PCR定量检测猪IFN-γmRNA

文献类型： 中文期刊

第一作者： 郭海龙

作者： 郭海龙;童光志;仇华吉;周艳君;兰文生;王云峰;吴东来

作者机构：

关键词： 猪IFN-γ;竞争PCR;内对照;嵌入光密度

期刊名称： 中国兽医学报

ISSN：

年卷期： 2003 年 03 期

页码： 278-280

收录情况： CSCD

摘要： 运用RT-PCR从经ConA体外刺激培养的猪外周血单核细胞(PBMC)提取的细胞总RNA中扩增猪γ-干扰素(IFN-γ)的部分片段,经酶切鉴定后双酶切缺失中间一小片段,将余下的2个较大片段连接,并用相同的引物在相同条件下扩增连接产物,从而获得截短的同源性片段。将其纯化后克隆于pMD18-T载体,重组质粒经酶切和PCR鉴定后进行序列测定,验证无误后作为竞争性模板内对照,一定比例稀释后分别与等体积经刺激培养的PBMC总RNA反转录产物进行PCR,产物电泳后经扫描分析获得各目标条带与竞争条带的溴化乙锭(EB)嵌入光密度值(IOD),经校正后取上述两...

分类号：

  • 相关文献

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[2]应用竞争PCR方法检测亚硝化细菌的研究. 张艳,李秋芬,王晓熙. 2009

[3]猪干扰素-γ基因的表达、纯化及活性分析. 潘晓梅,窦永喜,骆学农,刘琼,张冬峰,岳城,才学鹏. 2009

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