采用AFLP分析齐口裂腹鱼DNA指纹的技术探讨

文献类型： 中文期刊

第一作者： 宋君

作者： 张容;宋昭彬;郭灵安;王东;雷绍荣

作者机构：

关键词： AFLP;基因组DNA制备;条件优化;银染

期刊名称： 中国测试技术

ISSN： 1672-4984

年卷期： 2008 年 01 期

页码： 125-127

摘要： AFLP(选择性扩增片断长度多态性)指纹技术被认为是当今最有效的DNA指纹分析技术之一,但是由于该技术操作流程较长,对模板DNA质量要求较高以及PCR反应成分等变数条件的影响,要获得高清晰的DNA指纹图谱比较困难。文中以齐口裂腹鱼为研究对象,对AFLP的分析条件作了一定的探索。结果表明:基因组DNA必须是高纯度、高分子量;酶切充分;PCR反应最佳条件为:引物E-XYZ,M-XYZ在体系中的浓度分别为1ng/mL,5ng/mL;dNTPs浓度为0.2mmol/L;MgCl2浓度为1.9mmol/L。银染时在NaOH条件下显色比在传统银染法中的Na2CO3条件下显色,图谱背景更干净,条带更清晰。

分类号： Q78

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