口蹄疫病毒O型中和单克隆抗体的制备及其抗原表位鉴定
文献类型: 中文期刊
第一作者: 孙悦
作者: 孙悦;邵军军;高闪电;周广青;郭慧琛;常惠芸;张勇;赵兴绪;刘伟
作者机构:
关键词: 口蹄疫病毒;血清型;VP1;中和抗体;表位鉴定
期刊名称: 中国兽医学报
ISSN: 1005-4545
年卷期: 2025 年 45 卷 009 期
页码: 1849-1856
收录情况: 北大核心 ; CSCD
摘要: 口蹄疫病毒(foot-and-mouth disease virus,FMDV)不同血清型间没有交叉免疫保护作用,但动物在疫苗免疫后所产生的不同血清型抗体存在交叉反应,为制备抗O型FMDV的中和单克隆抗体,建立一种基于mAb区分O型与A型FMDV抗体的方法.采用灭活的O型FMDV免疫BALB/c小鼠制备单克隆抗体,在大肠杆菌中表达了一系列GST融合重叠肽和截短肽,确定单抗识别的抗原表位,利用阻断ELISA检测了已知背景的O型和A型FMDV阳性血清、阴性血清各20份,验证筛选单抗在诊断中的可行性.结果显示,共获得5株单克隆抗体;Western blot和间接荧光免疫试验(IFA)结果显示,这5株单抗只与O型FMDV反应,不与A型FMDV反应;病毒微量中和试验(VNT)结果显示这5株单抗均对FMDV/O/MY98/GZBY/2013有中和能力;5株单抗识别同一表位,最小识别表位为145 RGDLQVLA152,其中Arg145和Gln149为关键氨基酸,序列比对发现该表位在大部分O型FMDV毒株中是保守的,而在所有的A、Asia 1和SAT1~3型FMDV毒株中Gin149都发生突变;阻断ELISA结果显示mAb-8C5D3可以区分O型和A型抗体.
分类号: S852.65
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