棉铃虫中肠Bt毒素受体蛋白(APN)的分离与纯化

文献类型： 中文期刊

第一作者： 梁革梅

作者： 徐广;王桂荣;吴孔明;郭予元

作者机构：

关键词： 棉铃虫;受体蛋白;刷状缘膜囊泡;氨肽酶N

期刊名称： 农业生物技术学报

ISSN： 1006-1304

年卷期： 2005 年 13 卷 01 期

页码： 102-107

收录情况： CSCD

摘要： 利用Mg/EGTA方法,以不同的速度进行离心,成功地分离了棉铃虫(Bacillusthuringiensis)中肠刷状缘膜囊泡(BB-MV0,BBMV中保留了大部分氨肽酶N(aminopeptidaseN,APN)活性,BBMV中APN的特异活性较粗匀浆液相比提高了3.29倍;CHAPS3-[(3-chlor-amidopropyl)dimethylammonio]-1-propanesulphonate可以增加BBMV的溶解,加入1%(CHAPS)之后APN特异活性增加至5.21倍;利用磷酸酰肌醇特异性的磷脂酶(PI-PLC)能将APN从膜上解离下来,BBMV经PI-PLC处理后,SDS-PAGE电泳结果仅有120kD的1条带;Mono-Q和FPLC结合的方法可以纯化部分APN,SDS-PAGE电泳结果显示,经Mono-Q柱处理后的BBMV中分子量约100kD的蛋白条带加粗;棉铃虫3个抗性品系与敏感品系相比,APN特异活性差异不显著,说明棉铃虫对Bt产生抗性与APN活性的变化无关,抗性的产生可能与Bt毒素和APN结合能力的改变有关。

分类号： S433

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