马铃薯卷叶病毒外壳蛋白基因克隆转化及其转基因后代的表达
文献类型: 中文期刊
第一作者: 南相日
作者: 南相日;刘文萍;刘琦;夏善勇
作者机构:
关键词: 马铃薯;PLRV-CP基因;原生质体;克隆
期刊名称: 中国农学通报
ISSN: 1000-6850
年卷期: 2007 年 23 卷 07 期
页码: 106-109
摘要: 根据GenBank中的马铃薯卷叶病外壳蛋白基因(PLRV-CP)全序列,设计一对特异性引物,以马铃薯卷叶病毒RNA为模板,克隆了马铃薯卷叶病外壳蛋白基因,在pBI121的基础上构建了植物表达载体。利用PLO(Poly-L-Ornithine)将PLRV-CP基因导入到马铃薯加工型品种大西洋的原生质体中,获得了转基因后代。在5株转化后代中扩增出长度为610bp的目标DNA片断,说明导入的外源PLRV-CP基因已经整合到马铃薯基因组中。Southern blot分析结果进一步证明了PCR结果的正确性。RT-PCR结果表明,在3株转化后代叶片中具有阳性表达。马铃薯卷叶病毒接种实验结果表明,转基因植株比对照有明显的马铃薯卷叶病抗性。
分类号: S435.32
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