牛囊胚ICM克隆多能性标记基因与表面标记的研究

文献类型： 中文期刊

第一作者： 崔莉莎

作者： 崔莉莎;赵学明;郝海生;杜卫华;马友记;朱化彬;王宗礼

作者机构：

关键词： 牛;ICM;多能性标记;qRT-PCR

期刊名称： 畜牧兽医学报

ISSN： 0366-6964

年卷期： 2015 年 46 卷 07 期

页码： 1141-1149

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 本研究旨在探究牛类胚胎干细胞(Embryonic stem cells,ES)的多能性标记基因与表面标记,为优化牛类ES细胞培养条件和相关研究提供依据。利用2i/LIF培养液,通过全胚接种及机械传代法分离培养牛囊胚内细胞团(Inner cell mass,ICM),免疫荧光染色法检测其多能性标记基因与表面标记;qRT-PCR检测免疫磁珠法分选的牛囊胚ICM和滋养层细胞(Trophectoderm cell,TE)的多能性标记基因的差异表达结果。试验成功分离出了牛囊胚ICM克隆,并体外培养至第10代,且各代克隆均呈现出了典型的干细胞形态。结果表明,ICM表面标记SSEA1、SSEA4和TRA-1-60染色为阳性,且多能性标记基因OCT4、SOX2和NANOG在其中均有表达;OCT4、SOX2和NANOG在牛囊胚ICM和TE中的表达存在差异(P<0.05),其中SOX2的差异极显著(P<0.01)。综上表明,2i/LIF培养液有助于牛囊胚ICM的培养;SOX2可能成为牛ICM克隆的候选多能性标记基因。

分类号： S823

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