杧果脱镁叶绿素酶基因MiPPH的克隆及植物表达载体构建

文献类型： 中文期刊

第一作者： 俞凯莉

作者： 俞凯莉;赵志常;高爱平;罗睿雄;黄建峰;张梦云;李茂富

作者机构：

关键词： 杧果（Mangifera indica L.）;脱镁叶绿素酶（PPH）;基因克隆;植物表达载体

期刊名称： 分子植物育种

ISSN： 1672-416X

年卷期： 2023 年 011 期

页码： 3628-3635

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 叶绿素降解是果实色泽形成过程中一个主要的影响因素。脱镁叶绿素酶（pheophytinase, PPH）是叶绿素降解代谢的关键酶。本研究提取杧果果皮总RNA，采用RACE方法,克隆得到一个脱镁叶绿素酶基因，并对其进行了初步的生物信息学分析。序列分析表明MiPPH基因cDNA序列全长1 267 bp，开放阅读框为1 113 bp，可编码370个氨基酸，分子量为41.73 kD，等电点为5.22。使用NCBI上的Conserved domains分析MiPPH蛋白结构域,结果显示MiPPH含有PLN02578、Abhydrolase＿1共2个结构域，其中PLN02578为保守域,其他物种PPH也都含有这个水解酶（Hydrolase）保守域，说明PPH蛋白有高度的保守性。通过BLAST上其他植物的氨基酸序列进行相似性比对，利用DNAMAN生成的系统进化树发现杧果MiPPH蛋白序列和与同为漆树科的开心果的PPH蛋白序列相似度较高，亲缘关系较近。利用定量PCR技术对不同品种中的MiPPH基因表达量进行分析，发现绿色‘桂七’品种表达量最高，而黄色‘金煌’品种表达量最低，黄色‘金煌’品种和红色‘贵妃’品种表达量相差不大。本试验成功构建pCAMBIA2300-GFP-MiPPH植物表达载体，通过农杆菌介导的烟草瞬时表达，亚细胞定位MiPPH主要定位于细胞核。本试验为后续进行PPH基因的功能验证提供试验基础。

分类号： S667.7

  • 相关文献

[1]WRKY35转录因子的cDNA克隆与植物表达载体的构建. 伍林涛,杜才富,邵明波. 2010

[2]梭梭CMO基因的克隆与植物表达载体的构建. 石磊,甘晓燕,夏兴雷,陈虞超,李苗,宋玉霞. 2010

[3]东方山羊豆脱水蛋白基因的克隆及初步分析. 李玉坤,王学敏,王赞,李俊,Vladimir C,Nikolay D,孙桂枝,高洪文. 2012

[4]香蕉NPR1基因的克隆及植物表达载体构建. 陆英,张欣,漆艳香,蒲金基,谢艺贤. 2010

[5]甘蔗ACC氧化酶基因的克隆与植物表达载体构建. 王爱勤,韦波,何龙飞,杨丽涛,李杨瑞. 2008

[6]三角叶滨藜甜菜碱醛脱氢酶基因克隆及植物表达载体的构建. 何晓兰,吴纪中,刘桂华,张保龙,钦佩,侯喜林,朱卫民. 2003

[7]杧果PARMS反应体系的建立与优化. 刘静萍,肖熙鸥,周开兵,柳凤,张国辉,普金安,张翠英,沐云松. 2023

[8]杧果蔗糖合成酶MiSS基因的克隆与表达分析. 郭利军,邓会栋,冯学杰,罗志文,陈哲,范鸿雁,胡福初,华敏. 2021

[9]人胰岛素样生长因子-Ⅰ基因农杆菌工程菌株的构建. 周鹏,王跃进,贺普超. 2001

[10]小麦avenin-like type-B基因启动子的分离及表达载体的构建. 宋斐,陈泠,孙杨柳,王菲菲,汪越胜,杨广笑,何光源. 2012

[11]沙冬青脱水素基因的克隆及表达载体的构建. 乔慧蕾,王瑞刚,郭九峰,孙国琴,李国婧. 2009

[12]枣树抗坏血酸过氧化物酶基因ZjAPX生物信息学分析及植物表达载体的构建. 郝子琪,许洪仙,孟玉平,曹冬梅,曹秋芬. 2011

[13]哈茨木霉(Trichodermaharzianum)多种胞壁降解酶基因表达载体的构建及转化水稻. 刘梅,孙宗修,徐同. 2004

[14]草鱼呼肠孤病毒VP6蛋白与大肠杆菌LTB亚基植物融合表达载体的构建. 周勇,曾令兵,范玉顶,罗晓松,徐进,肖艺. 2011

[15]幽门螺杆菌CagA蛋白与CTB融合基因的克隆及其植物表达载体的构建. 姜云水,方平楚,付亚萍,朱诚. 2004

[16]抗虫基因CryIA(b)植物表达载体的构建. 易善军,陈少瑜,程在全,孙一丁,王寅冰,陈芳,吴涛. 2008

[17]哈茨木霉(Trichoderma harzianum)多种胞壁降解酶基因表达载体的构建及转化水稻. 刘梅,孙宗修,徐同. 2004

[18]转梭梭HaPrxQ基因拟南芥植株的获得与检测. 甘晓燕,吴明朝,周晓燕,石磊,宋玉霞. 2013

[19]Prd29A:PaDREB2植物表达载体的构建及转化新疆杨的研究. 秦红霞,张海超,刘敬梅,宋玉霞. 2010

[20]OsI2基因的克隆及其植物表达载体的构建. 刘三雄,刘灶长,周立国,余舜武,刘鸿艳,朱天生,罗利军. 2007

作者其他论文 更多>>

微信小程序