猪滤泡辅助性T细胞转录因子BCL6抗血清的制备及功能验证

文献类型： 中文期刊

第一作者： 何惠

作者： 何惠;付钰广;李宝玉;刘光亮

作者机构：

关键词： 猪;滤泡辅助性T细胞;转录因子BCL6;抗血清

期刊名称： 畜牧与兽医

ISSN： 0529-5130

年卷期： 2025 年 57 卷 011 期

页码： 46-53

收录情况： 北大核心

摘要： 旨在制备猪滤泡辅助性T(Tfh)细胞转录因子B细胞淋巴瘤6(BCL6)抗血清。根据GenBank中猪BCL6开放阅读框，优化设计并合成pET30a-BCL6和pcDNA3.1-BCL6重组表达载体，将重组载体p ET30a-BCL6转化入大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞，加入IPTG诱导表达BCL6蛋白，将纯化的目的蛋白与206佐剂混合乳化后经背部皮下免疫BALB/c小鼠，经过4次免疫后收集获得抗血清。采用ELISA检测血清抗体滴度，结果显示抗体水平随着免疫次数的增加而逐步升高，抗血清稀释至1∶16 000倍仍能与原核表达的BCL6蛋白反应;采用Western blot评价抗血清与原核表达BCL6蛋白的反应性，分析结果显示制备的抗血清可与原核表达BCL6蛋白特异性结合。为进一步验证抗血清与BCL6蛋白的反应性，将重组载体pc DNA3.1-BCL6转染HEK-293T细胞，采用Western blot评价抗血清的反应性，结果显示所制备的抗血清可与真核表达的BCL6蛋白特异性结合;采用间接免疫荧光(IFA)评价抗血清的反应性，IFA结果与Western blot结果一致，显示所制备的抗血清可与真核表达的BCL6蛋白特异性结合。综上，本研究成功制备了猪BCL6抗血清，为后期制备猪BCL6单克隆抗体及研究黏膜免疫过程中Tfh细胞的相关功能奠定了基础。

分类号： S852.4

  • 相关文献

[1]脂肪细胞膜抗血清对猪胴体品质和肉品质的影响. 杜改梅,刘茂军,王俊东. 2007

[2]鸭肝炎病毒A_(66)弱毒株的研究. 陈弘年,张小飞,孙林珍,吴世义,刘庆年,吴本立,朱传民. 1990

[3]猪穴位免疫鸡IBV疫苗后猪血清中抗鸡IBV抗体效价的变化. 黄庆洲,蒋厚迪,孟宪松,王成华,马先才. 2006

[4]滤泡辅助性T细胞及亚群紊乱参与儿童过敏性紫癜发病机制初探. 唐筱潇,李婷,陈学兰,张高福,黎小芹,王墨,阳海平,李秋. 2018

[5]免疫增强剂CVC1302辅助抗原诱导小鼠机体产生长效体液免疫应答的研究. 杜露平,侯立婷,于晓明,程海卫,郑其升,陈瑾. 2022

[6]鹅细小病毒VP基因片段的原核表达及抗血清的制备. 匬昱昊,王静,王懂帅,韩宗玺,刘胜旺,冉多良,孔宪刚. 2006

[7]甘露聚糖酶多克隆抗体的制备及其ELISA双抗夹心法的建立. 范文斌,王和平,刘永斌. 2014

[8]黑曲霉葡萄糖氧化酶基因的原核表达及其蛋白产物的Western-blot分析. 安玉麟,孙瑞芬,张鹤龄,郭树春,闫素丽. 2009

[9]水稻瘤矮病毒P8蛋白的结构分析及其表达. 高芳銮,范国成,沈建国,谢荔岩,林奇英,吴祖建,谢联辉. 2009

[10]鸡补体C3d抗血清的制备与应用. 闫敏鑫,黄秀芬,任慧英,刘杉杉,姜良,李永清. 2015

[11]侵染马铃薯的一个Tospovirus混合分离物的鉴定、纯化及多抗血清制备. 丁铭,张丽珍,方琦,李婷婷,苏晓霞,李展,张仲凯. 2004

[12]甜瓜黄斑病毒外壳蛋白的原核表达、多克隆抗体制备及其应用. 曾蓉,徐丽慧,高士刚,戴富明. 2017

[13]大菱鲆血清免疫球蛋白IgM的纯化及应用研究. 魏鉴腾,陈吉祥,王淑娴,张晓华,王印庚. 2008

[14]黄瓜S期激酶相关蛋白Skp1的原核表达及其多克隆抗体的制备. 孙新艳,魏莹,韩晓玉,王振跃,陈琳琳,燕照玲,施艳. 2017

[15]中国水仙NtPLATZ1抗血清的制备及效价分析. 王伟英,邹晖,李海明,戴艺民,林江波. 2018

[16]甘薯褪绿矮化病毒RNase3蛋白的原核表达及抗血清制备. 秦艳红,乔奇,王爽,张德胜,王永江,田雨婷,张振臣. 2018

[17]禽流感病毒PB2亚单位抗血清的制备. 葛叶,邓国华,李雪平,陈化兰. 2010

[18]结合态GA_3的间接酶联免疫吸附测定研究. 郑秋玲. 2010

[19]鸡传染性法氏囊病病毒抗血清的研制. 王占伟,邵国青,刘茂军,冯志新,王丽,高云飞,周开华,尹秀凤. 2012

[20]迟钝爱德华氏菌鞭毛蛋白的提取与分析. 张晓佩,龚晖,陈如敬,杨金先,林天龙. 2008

作者其他论文 更多>>

微信小程序