猪圆环病毒2型ELISA抗体检测试剂盒的研制及应用

文献类型: 中文期刊

第一作者: 张朝霞

作者: 张朝霞;刘长明;危艳武;袁婧;黄立平

作者机构:

关键词: 猪圆环病毒2型;重组蛋白;间接ELISA;抗体检测试剂盒

期刊名称: 中国预防兽医学报

ISSN: 1008-0589

年卷期: 2008 年 30 卷 07 期

页码: 548-551+578

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 利用纯化的重组杆状病毒表达猪圆环病毒2型(PCV2)Cap蛋白作为检测抗原,建立一种间接ELISA方法用于血清抗体检测。昆虫细胞株(Sf-21)接种重组杆状病毒,对蛋白表达参数及纯化工艺进行了优化,制备了5批重组蛋白抗原,表达量占总蛋白的18.7%左右;Ni2+亲和层析柱纯化获得重组蛋白纯度为90.1%;重组蛋白可被特异性抗体识别,具有良好的免疫活性。用建立的ELISA法对30份已知阴性血清样本检测临界OD405nm值为0.343;ELISA与IPMA对150份血清进行平行检测符合率为95.3%,特异性为91.2%,敏感性为96.5%;与其他几种常见猪病毒参考血清无交叉反应。组装的试剂盒批内和批间变异系数分别为4.0%~4.8%和8.9%~9.9%;置-20℃保存12个月稳定。试剂盒对人工感染猪血清检测结果,接种后第5周抗体阳转,第8周~9周抗体水平达到高峰;对来自黑龙江、吉林、河北、上海等地猪场1085份血清抗体检测,阳性率为73.6%。研制的ELISA试剂盒为临床PCV2血清抗体检测及疫苗免疫效果的评价提供了技术手段。

分类号: S854.43

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