狂犬病病毒核蛋白的原核表达及纯化

文献类型: 中文期刊

第一作者: 焦文强

作者: 焦文强;胡永浩;殷相平;李志勇;柳纪省

作者机构:

关键词: 狂犬病病毒;核蛋白;原核表达

期刊名称: 贵州农业科学

ISSN: 1001-3601

年卷期: 2009 年 37 卷 12 期

页码: 136-139

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 采用RT-PCR方法扩增出狂犬病病毒(RV)CVS株核蛋白(N)基因,并将目的基因亚克隆入原表达载体pET-28a(+)中,经PCR、双酶切以及序列分析,结果表明:已成功构建了重组质粒。将重组质粒转化至大肠埃希氏菌Rossetta(DE3),在37℃,1 mmol/LIPTG条件下进行诱导表达。诱导产物经SDS-PAGE分析,在分子量约为54 KD附近出现较粗的目的带,与预期的目的蛋白分子量相符合。经表达条件优化,用1 mmol/LIPTG在37℃诱导表达5h,表达量达到最高,Western-Blotting鉴定目的蛋白有较强的免疫原性。为狂犬病毒的N蛋白的新型疫苗的制备奠定了基础。

分类号: S852.5

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