Asia1型口蹄疫病毒3B蛋白单克隆抗体的制备与鉴定

文献类型： 中文期刊

第一作者： 刘华南

作者： 刘华南;杨帆;杨华;吕律;曹伟军

作者机构：

关键词： 口蹄疫病毒;3B蛋白;单克隆抗体

期刊名称： 中国兽医科学

ISSN： 1673-4696

年卷期： 2015 年 45 卷 12 期

页码： 1225-1230

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 为了获得Asia1型口蹄疫病毒非结构蛋白3B的单克隆抗体,以含Asia1型FMDV/JS/05毒株3B基因的pCAGGS-3B质粒为模板,扩增3B蛋白基因,并克隆至pET-30a(+)载体,进行原核表达及纯化。分别以Asia1型口蹄疫病毒、纯化的3B蛋白为抗原,免疫4~6周龄的雌性BALB/c小鼠,经过4次免疫后,取小鼠脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞按5∶1~10∶1进行细胞融合,用本实验室建立的间接ELISA对融合后的细胞进行筛选,并进行4次有限稀释筛选出的阳性细胞扩大培养后,注射小鼠腹腔,制备腹水。对制备的腹水进行类别鉴定、反应原性和效价鉴定。结果表明,获得1株能稳定分泌抗Asia1型口蹄疫病毒3B蛋白的细胞株,其抗体类别为IgM,腹水效价为1∶12 800,通过Western-blot和间接免疫荧光试验,确定其能识别口蹄疫病毒3B蛋白。

分类号： S852.4

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