日本血吸虫凋亡基因Sjcaspase3的克隆、真核表达及其功能分析

文献类型： 中文期刊

第一作者： 王涛

作者： 王涛;洪炀;韩宏晓;吕超;贾秉光;曹晓丹;韩倩;陆珂;李浩;傅志强;林矫矫

作者机构：

关键词： 日本血吸虫;caspase3;细胞凋亡;酶活;细胞流式

期刊名称： 生物工程学报

ISSN： 1000-3061

年卷期： 2016 年 32 卷 07 期

页码： 889-900

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 为深入研究日本血吸虫细胞凋亡机制。利用PCR技术扩增得到Sjcaspase3的全长序列,其ORF含900 bp,编码299个氨基酸,理论分子量为33 509.7 Da,理论等电点为6.39。Real-time PCR分析表明该基因在日本血吸虫生长发育的各个时期均有表达,其中21 d表达量最高,42 d雌虫表达量高于42 d雄虫。成功构建了p XJ40-FLAG-Sjcaspase3重组质粒并转染到Hela细胞内,荧光定量PCR和Western blotting分析表明Sjcaspase3成功在Hela细胞中表达。酶活分析提示重组Sjcaspase3具有切割特异性底物天冬氨酸-谷氨酸-缬氨酸-天冬氨酸(DEVD)的活性。流式细胞术检测了Sjcaspase3可诱导Hela细胞发生早期细胞凋亡。研究结果为深入探讨Sjcaspase3的生物学功能及日本血吸虫细胞凋亡机制奠定了基础。

分类号： R383.24

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