犬疥蟎副肌球蛋白抗血清的制备及临床应用

文献类型： 中文期刊

第一作者： 李红飞

作者： 李红飞;赵传壁;姚国佳;王海华;夏艳勋;皇甫和平;张磊;沈永恕;张华;米俊宪;叶晓敏

作者机构：

关键词： 疥蟎;副肌球蛋白;抗血清;临床应用

期刊名称： 郑州牧业工程高等专科学校学报

ISSN： 1008-3111

年卷期： 2014 年 34 卷 01 期

页码： 11-17

摘要： 目的:利用现代分子生物学方法,建立一种准确率更高的犬疥蟎病的诊断方法,为犬疥蟎病的治疗提供诊断基础。方法:收集犬疥蟎,抽提总RNA并将其反转录为cDNA;以该cDNA为模板,参考其它哺乳动物副肌球蛋白的基因序列特征,设计引物扩增含有多个抗原表位的犬副肌球蛋白的部分cDNA序列;构建原核表达载体,表达及纯化目的蛋白片段;以纯化的目的蛋白片段为抗原,免疫BALB/c小鼠制备抗血清;以制备的抗血清为一抗,通过间接ELISA法测定患病犬痂皮组织中疥蟎副肌球蛋白片段的存在,进而判断是否有疥蟎感染。结果:成功构建了副肌球蛋白的原核表达载体,命名为pET28a-Para-202;通过诱导、纯化获得了重组蛋白;该重组蛋白抗原免疫小鼠后获得高效价的抗血清;以该抗血清为工具,通过间接ELISA法极大提高了犬疥蟎感染的诊断率,为该病治疗提供了重要的参考依据。

分类号： S858.292

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