紫花苜蓿MsZIP基因超表达载体的构建及转基因苜蓿检测

文献类型： 中文期刊

第一作者： 李燕

作者： 孙彦;杨青川;康俊梅;张铁军;房锋

作者机构：

关键词： 紫花苜蓿;MsZIP基因;超表达载体;苜蓿转化;转基因苜蓿检测

期刊名称： 草业学报

ISSN： 1004-5759

年卷期： 2012 年 21 卷 06 期

页码： 182-189

收录情况： 北大核心

摘要： 根据已经克隆得到的MsZIP基因(GenBank序列号:HQ911778),扩增编码区cDNA,构建植物超表达载体PBI-MsZIP。酶切鉴定表明,目的基因已经正确的插入到载体中,超表达载体构建成功。采用CaCl2冻融法将其转入农杆菌菌株中,然后采用农杆菌介导的方法,转化紫花苜蓿,共得到11株抗性苗,对其中的4株进行卡那霉素基因PCR检测,均得到了目的条带。同时对这4株抗性苗进行目的基因的RT-PCR检测,均得到了目的条带。说明MsZIP基因已经成功在苜蓿中超表达。为了进一步验证该基因的功能,分别用200mmol/L NaCl和25μmol/LPEG-6000处理转基因苜蓿,3d后进行生理指标的测定。结果表明,MsZIP基因在苜蓿中超表达可以提高苜蓿的耐盐性和耐旱性。

分类号： S541.9

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