金黄色葡萄球菌新型耐热核酸酶(Nuc2)的定点突变与特性分析

文献类型： 中文期刊

第一作者： 陈丽敏

作者： 陈丽敏;施春雷;王大鹏;张道锋;史贤明

作者机构：

关键词： 金黄色葡萄球菌;新型耐热核酸酶;定点突变;二级结构

期刊名称： 食品工业科技

ISSN： 1002-0306

年卷期： 2015 年 36 卷 17 期

页码： 156-160+169

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 本研究选取了F60、A62、T102和Y135这4个可能的关键位点,采用定点突变的方法成功构建了5个Nuc2的单点和多点突变体。体外表达并纯化这些核酸酶,对其活性、耐热性和二级结构进行测定。结果表明:经方差分析(p<0.05),T102M和F60A/A62L/T102M/Y135V的核酸酶活性与野生型相比较显著下降,并且F60A/A62L/T102M/Y135V的酶活性基本丧失;T102M和F60A/A62L的耐热性明显弱于野生型;T102M和F60V/A62L的二级结构中α-螺旋结构的含量明显低于野生型,F60A/A62L/T102M/Y135V的二级结构中包含有无规卷曲。因此,推断T102是维持Nuc2核酸酶活性、耐热性和二级结构稳定的一个关键位点;F60、A62、T102和Y135及其与邻近氨基酸之间的相互作用对维持Nuc2的性质稳定起着重要作用。

分类号： TS201.3

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