鸽新城疫F基因毕赤酵母表达载体的构建

文献类型： 中文期刊

第一作者： 杨明

作者： 杨明;贺泂杰;郭慧琳;贺奋义;陈伯祥

作者机构：

关键词： 鸽新城疫;F基因,毕赤酵母;载体构建

期刊名称： 国外畜牧学(猪与禽)

ISSN： 1001-0769

年卷期： 2013 年 33 卷 12 期

页码： 80-82+88

摘要： 应用特异性引物,从鸽新城疫F基因重组质粒pMD-18T-PPMV-1-F中PCR扩增F基因,用EcoRⅠ和NotⅠ分别对扩增产物和酵母表达质粒pPIC9K进行双酶切,将F基因定向克隆到pPIC9K的EcoRⅠ和NotⅠ位点,构建重组质粒pPIC9K-PPMV-1-F,对重组质粒鉴定后用SalⅠ酶切使其线性化,电击转化至感受态毕赤酵母GS115菌中,影印接种法筛选G418抗性菌株,提取酵母染色体DNA进行PCR鉴定,筛选出鸽新城疫F基因的高拷贝重组菌株。

分类号： S852.65

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