正交设计优化扁蓿豆ISSR反应体系的研究(英文)

文献类型： 中文期刊

第一作者： 李志勇

作者： 李志勇;李鸿雁;孙启忠;王小丽;师文贵;邢建军

作者机构：

关键词： 扁蓿豆;ISSR;正交设计;反应体系;优化

期刊名称： 华北农学报

ISSN： 1000-7091

年卷期： 2010 年 25 卷 06 期

页码： 100-106

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 以扁蓿豆(Medicago ruthenica)为试材,采用改良的CTAB法提取DNA,利用正交设计L16(45)探讨10×PCRBuffer(含Mg2+)、dNTPs、引物、TaqDNA聚合酶及模板DNA用量对扁蓿豆ISSR-PCR反应的影响,正交试验的结果采用直观分析和方差分析相结合。建立了扁蓿豆的ISSR-PCR优化反应体系,在25μL反应体系中,TaqDNA聚合酶1.5U,10×PCR Buffer(含Mg2+)2.0 mmol/L,模板DNA0.5 ng/μL,dNTPs 0.6 mmol/L,引物0.9μmol/L。同时探讨引物HZD09211的最适退火温度为52.3℃。2个不同引物对20份扁蓿豆材料DNA进行ISSR-PCR扩增,结果显示该体系具有较高的稳定性。

分类号： S541.9

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