绿色荧光蛋白标记荧光假单胞菌P303及其生存能力检测

文献类型： 中文期刊

第一作者： 张霞

作者： 张杰;李国勋;黄大昉;陈中义

作者机构：

关键词： 荧光假单胞菌;绿色荧光蛋白;接合转移;Southern 杂交;定殖

期刊名称： 植物保护学报

ISSN： 0577-7518

年卷期： 2005 年 32 卷 03 期

页码： 280-286

收录情况： CSCD

摘要： 构建了含有荧光假单胞菌自身启动子 P_(P303)的中间质粒载体 pGFP。然后利用 mini-Tn5转座子,通过接合转移,将两个带有不同启动子的绿色荧光蛋白基因分别整合到荧光假单胞菌 P303染色体上,获得了在488nm 波长下发光稳定的 P303m1和 P303m3菌株。PCR 鉴定和 Southern 印迹结果均证明绿色荧光蛋白已随机插入 P303染色体。SDS-PAGE 结果表明,含有 P_(A1/04/03)启动子的P303m3菌株 GFP 表达量低于含有 P_(P303)启动子的 P303m1菌株,染色体标记的 GFP 表达量低于质粒标记。室内平板抑菌试验结果表明,P303m1与出发菌株 P303抑菌活性相当,对九种植物病原真菌有较强的拮抗作用。定殖、生存竞争能力研究表明,荧光假单胞菌在自然土壤中和大白菜根际都具有较强的定殖能力。P303和 P303m1在自然土壤中第60天的菌量分别为1.63×10~4和3.3×10~2cfu/g 土(湿重),大白菜根际第50天的菌量分别为3.29×10~6和4.1×10~4cfu/g 根(湿重)。

分类号： S476

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