丝瓜过氧化物酶基因的克隆及其在果实褐变中的表达分析

文献类型： 中文期刊

第一作者： 朱海生

作者： 朱海生;刘建汀;王彬;陈敏氡;张前荣;叶新如;林珲;李永平;温庆放

作者机构：

关键词： 丝瓜;褐变;过氧化物酶(POD);基因克隆

期刊名称： 农业生物技术学报

ISSN： 1674-7968

年卷期： 2018 年 01 期

页码： 43-52

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 过氧化物酶(Peroxidase,POD)是参与酚类物质氧化的主要酶类之一,在果蔬褐变中发挥着重要作用。为了探究丝瓜(Luffa cylindrical)中POD基因的功能,本研究以丝瓜果实为材料,采用cDNA末端快速克隆(rapid-amplification of cDNA ends,RACE)和逆转录-聚合酶链反应(reverse transcription-PCR,RTPCR)技术克隆获得丝瓜POD基因,命名为LcPOD,GenBank登录号为:KM506755。该基因编码的蛋白与甜瓜(Cucumis melo,XP_008449774.1)、西葫芦(Cucurbita pepo,ABF68751.1)、黄瓜(Cucumis.sativus,NP_001295810.1)中同源蛋白的相似性均在80%以上,显示其高度的保守性。MotifScan分析表明,丝瓜POD氨基酸序列81~191位为过氧化物酶近端血红素-配体特征序列,55~66位为过氧化物酶活性位点特征序列,推测其属于典型的第Ⅲ类过氧化物酶。Wolf Psort预测其亚细胞定位于细胞壁中。实时荧光定量PCR分析显示,LcPOD表达量在丝瓜根中最高,茎中最低。在普通丝瓜(L.cylindrica)中的表达量高于在有棱丝瓜(L.acutangula)中的表达量。在鲜切及采后储藏条件下,LcPOD基因表达量、POD活性、总酚含量与丝瓜褐变存在较高相关性。LcPOD可能在果肉褐变调控中起一定作用。研究结果为进一步揭示丝瓜褐变的发生机理提供了科学依据,为丝瓜品种遗传改良提供了基础资料。

分类号： S642.4

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