猪IFN-γmRNATaqMan荧光定量RT-PCR检测方法的建立

文献类型: 中文期刊

第一作者: 韦天超

作者: 韦天超;田志军;周艳君;安同庆;肖燕;彭金美;姜一峰;童光志

作者机构:

关键词: 猪;IFN-γ;荧光定量RT-PCR;TaqMan荧光探针

期刊名称: 中国兽医科学

ISSN:

年卷期: 2009 年 02 期

页码: 168-172

收录情况: CSCD

摘要: 为建立一种检测猪γ-干扰素(IFN-γ)的荧光定量RT-PCR方法,针对猪IFN-γ基因和管家基因cyclophilinA(CyPA)的核苷酸序列分别设计了特异性引物和TaqMan荧光探针,以重组质粒pMD18-T-IFN-γ和pMD18-T-CyPA为标准品,进行实时荧光定量RT-PCR检测,并构建猪IFN-γmRNA和CyPA的荧光定量RT-PCR标准曲线。结果表明,建立的方法在1×101~1×107copies/μL模板范围内具有良好的线性关系,相关系数r2均高达0.999,扩增效率均高于99.0%;可检测至少为100copies的阳性标准品。该方法具有快速、敏感性高、特异性强和重复...

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