猪MHC-Ⅰα生物素化序列融合基因的构建、表达与纯化

文献类型： 中文期刊

第一作者： 肖一红

作者： 肖一红;刘光亮;王群;童铁钢;白宇;孟庆文;吴东来

作者机构：

关键词： MHC-Ⅰ;SLA-Ⅰ;克隆;生物素化序列;表达;纯化

期刊名称： 中国兽医学报

ISSN：

年卷期： 2008 年 04 期

页码： 456-460

收录情况： CSCD

摘要： 采用RT-PCR技术从猪外周血单核细胞(PBMC)中获得猪白细胞抗原基因座P1、P14等位基因的胞外区,并在其3′端拼接上依赖BirA酶的可生物素化序列(BSP),构建了pET-P1-BSP和pET-P14-BSP高效表达载体并进行诱导表达和纯化,用SDS-PAGE和Westernblotting法对表达产物进行鉴定。结果显示,成功构建了融合表达载体pET-P1-BSP和pET-P14-BSP,表达产物以包涵体的形式存在,获得高纯度的P1-BSP和P14-BSP蛋白,为进一步利用亲和素在体外构建SLA-I类分子肽四聚体奠定了基础。

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