文献类型: 中文期刊
第一作者: 李菁
作者: 李菁;林彤;高闪电;丛国正;独军政;邵军军;常惠芸
作者机构:
关键词: A型口蹄疫病毒;结构蛋白VP1;表达及纯化
期刊名称: AgriculturalScience&Technology
ISSN:
年卷期: 2010 年 02 期
页码: 23-26
收录情况: CSCD
摘要: [目的]表达口蹄疫病毒结构蛋白VP1,并对其进行纯化和相关活性的检测。[方法]以A型口蹄疫病毒结构蛋白VP1重组质粒pGEM-VP1为模板,用特异性表达引物扩增其编码区,经酶切后与pGEX-4T-1、pPROExHTb等原核表达载体相连,转化大肠杆菌BL21(DE3)pLysS表达菌株,经IPTG诱导表达,以实现VP1蛋白的表达,SDS-PAGE鉴定融合蛋白的表达并对2种载体重组菌进行超声裂解,取上清和沉淀电泳,用金属螯合亲合层析法对His-VP1进行纯化。[结果]SDS-PAGE电泳分析显示pPRO-VP1诱导后目的条带为33Ku,与预期结果相符;目的蛋白纯化后,在电泳图片上显示较为清晰的单...
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