猪白细胞介素-12的分子克隆与序列测定

文献类型： 中文期刊

第一作者： 兰文升

作者： 兰文升;童光志;仇华吉;周艳君;王云峰;郭海龙

作者机构：

关键词： 猪IL-12;基因克隆;PBMC

期刊名称： 动物医学进展

ISSN： 1007-5038

年卷期： 2002 年 23 卷 01 期

页码： 38-41

摘要： 为研究白细胞介素－１２在机体免疫应答中的作用，从猪外周血提取单个核细胞（ＰＢＭＣｓ），用含ＬＰＳ的培养基培养细胞，从培养２　ｈ和１２　ｈ的活化细胞中分别提取总ＲＮＡ，用ＲＴ－ＰＣＲ方法扩增出编码猪ＩＬ－１２两个亚基的基因，其大小分别为７２０　ｂｐ（Ｐ３５）和１　０４４　ｂｐ（Ｐ４０），将扩增产物经琼脂糖凝胶电泳后，回收纯化，用ＳａｃＩ和ＳａｌＩ双酶切后，分别将其连接至ｐＵＣ１８质粒上，进行质粒ＰＣＲ和ＳａｃＩ、ＳａｌＩ双酶切鉴定后筛选阳性克隆，并进行序列测定和分析。序列分析表明Ｐ３５基因开放阅读框含有６６９个核苷酸，序列与人、小鼠和羊同源性分别为７９．２％，３７．６％　，８６．１％，Ｐ４０基因开放阅读框含有９７５个核苷酸，与人和小鼠、羊基因序列的同源性分别为７９．５％，５３．１％，８４．３％。结果表明克隆到了猪白细胞介素－１２　Ｐ３５和Ｐ４０两个亚基的基因，得到的Ｐ３５基因序列与国外报道完全一致，Ｐ４０基因序列与发表的序列有４个碱基差异，提示Ｐ４０基因可能存在多态性。

分类号： S188

  • 相关文献

[1]体外筛选对猪具有免疫刺激活性的CpG ODN. 马艳琴,李光富,朱鸿飞,邵国青,张兆松,张映,聂向庭. 2003

[2]猪白细胞介素-10的分子克隆与序列测定. 兰文升,童光志,仇华吉,王云峰,周艳君,郭海龙. 2002

[3]防治鸭传染性浆膜炎中药组方的筛选及应用. 容庭,王刚,李书宏,刘志昌,何伟灵,彭广辉,陈庄. 2009

[4]猪外周血单个核细胞cDNA酵母表达文库的构建及与猪瘟病毒E2蛋白相互作用细胞蛋白的筛选. 廖亚金,李素,贺番,何文瑞,董泓,冯烁,孙元,仇华吉. 2013

[5]扩增未知序列DNA片段的PCR技术研究进展. 王景雪,孙毅,梁爱华. 2001

[6]WRKY35转录因子的cDNA克隆与植物表达载体的构建. 伍林涛,杜才富,邵明波. 2010

[7]多花水仙WRKY转录因子的克隆与序列分析. 李欢,何炎森,李科,申艳红,吴用,陈晓静. 2014

[8]甘蓝型油菜磷脂二酰甘油酰基转移酶(BnPDAT1)cDNA的克隆和功能鉴定. 谭太龙,冯韬,罗海燕,彭烨,刘睿洋,官春云. 2016

[9]番茄抗黄化曲叶病毒病相关基因ClNLR的功能分析. 李楠,杨玛丽,陈天子,张保龙,赵统敏,杨郁文,刘廷利,余文贵. 2014

[10]三疣梭子蟹蜕皮激素受体EcR基因的cDNA克隆及表达分析. 张晓燕,李健,刘萍,陈萍,孙铭,葛红星. 2014

[11]龙眼体胚发生相关未知蛋白DlUP-3基因的克隆与表达分析. 赖呈纯,赖钟雄,林玉玲. 2014

[12]小麦锌指蛋白基因的克隆、序列与表达分析(英文). 万平,令利军,周文娟,张文俊,凌宏清,朱立煌,张相岐. 2004

[13]中国对虾血蓝蛋白基因cDNA的克隆与序列分析. 孙杰,王宝杰,孙姝娟,李晓华,姜珊,刘梅,蒋克勇,王雷. 2010

[14]龙眼体胚相关未知蛋白基因DlUP-5的克隆及其在龙眼体胚发生过程中的表达. 赖呈纯,林玉玲,赖钟雄. 2012

[15]紫色甘薯渝紫薯7号黄烷酮3-羟化酶基因的克隆和序列分析. 黄元射,舒田,毛景欣,陈敏. 2016

[16]马铃薯X病毒外壳蛋白基因的克隆与系统进化分析. 黄永会,朱英,刘永翔. 2014

[17]芸芥木葡聚糖内糖基转移酶/水解酶基因EsXTH1的cDNA克隆和生物信息学分析. 陈姣荣,方彦,孙万仓,令利军,姜海杨. 2013

[18]湖北海棠MhWRKY42基因克隆及表达分析. 罗昌国,乔玉山,渠慎春,张计育,王三红. 2013

[19]谢瓦氏曲霉间型变种flbA基因cDNA的全长克隆及序列分析. 王玉臣,谭玉梅,刘永翔,刘作易. 2013

[20]花生谷氨酸脱氢酶基因AhGDH1的克隆与生物信息学分析. 陈湘瑜,徐日荣,林栩松,唐兆秀. 2016

作者其他论文 更多>>

微信小程序