B19和B21单倍型鸡NK细胞受体B-NK19和B-NK21的多克隆抗体制备及鉴定

文献类型： 中文期刊

第一作者： 杨超

作者： 杨超;张晓娜;许峰铭;文辉强;廉传江;陈洪岩;韩凌霞

作者机构：

关键词： 鸡NK细胞受体;B-NK;B19单倍型;B21单倍型;多克隆抗体

期刊名称： 细胞与分子免疫学杂志

ISSN： 1007-8738

年卷期： 2014 年 30 卷 12 期

页码： 1274-1277

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 目的利用大肠杆菌系统表达对多种禽病存在敏感性差异的B19和B21单倍型鸡NK细胞抑制性受体B-NK基因,并制备其多克隆抗体。方法分别提取B19和B21鸡外周血淋巴细胞总RNA,采用反转录PCR法扩增B-NK基因(分别命名为B-NK19和B-NK21),克隆至pET-30a原核表达载体中,经酶切和PCR鉴定构建重组质粒。转入到大肠杆菌BL21(DE3)中诱导表达,SDS-PAGE分析外源蛋白的表达。将含有与组氨酸(His)标签融合表达的外源蛋白胶条切下,多点皮下免疫新西兰兔,分别制备B-NK19和B-NK21特异性多克隆抗体。利用Western blot法鉴定其组织相容性复合体(MHC)单倍型特异性。结果成功构建了原核表达重组质粒pET-B-NK19和pET-B-NK21,利用IPTG在37℃诱导4 h后目的蛋白获得表达,免疫5次后收获兔多克隆抗体,Western blot表明B-NK19和B-NK21蛋白存在免疫学交叉反应和部分特异性。结论对多种禽病具有敏感性差异的MHC单倍体型B19和B21鸡的NK细胞抑制性受体B-NK蛋白存在抗原反应交叉性,其多克隆抗体具有部分特异性。

分类号： S858.31

  • 相关文献

[1]类圆环病毒因子P1结构蛋白表位肽抗体的制备及应用. 温立斌,何孔旺,杨汉春,刘梦雅. 2011

[2]Carboxin抗性基因(Cbx~R)原核表达及多克隆抗体的制备. 李小宇,张正坤,王秋华,张春雨,张淋淋. 2015

[3]大豆脂肪氧化酶同功酶联合鉴定技术的建立. 马志民,秦君,杨春燕,邸锐,闫龙,张梅申,李子千,李亚璞,史晓蕾,鲍聪,许宁,封树平,张孟臣. 2014

[4]磺胺类药物多克隆抗体的制备与ELISA检测方法的初步研究. 孙俊颖,于洪意,黄显会,高海,杨桂香,曾振灵. 2008

[5]猪CD40L基因的原核表达及特异性多克隆抗体制备. 薛刚,祝长青,郑其升,张雪花,李倬,侯继波. 2011

[6]微囊藻毒素(MC-LR)多克隆抗体的制备、纯化及鉴定. 赵晓联,孙蔚榕,刘媛,刘贤金. 2006

[7]延边白鹅IFN-α基因的原核表达及其表达产物生物学活性的研究. 彭永刚,陈海迪,高旭,张颖,鲁承. 2014

[8]青虾血蓝蛋白基因的克隆、表达分析及多克隆抗体的制备. 孙盛明,戈贤平,傅洪拓,朱健,张世勇,乔慧. 2014

[9]绵羊肌肉抑制素C-端的表达、纯化及多克隆抗体的制备. 马毅,舒建洪,李晴,关宏,安晓荣,陈永福. 2009

[10]新型鸭呼肠孤病毒σC蛋白的原核表达及其多克隆抗体制备. 毕庄莉,朱英奇,陈宗艳,李传峰,孟春春,王桂军,刘光清. 2014

[11]Asial型口蹄疫病毒分离株P1基因的原核表达及其多克隆抗体的制备. 张中旺,张永光,王永录,潘丽,张昱. 2009

[12]氰戊菊酯免疫分析关键试剂人工抗原的合成与应用效果. 姜娟,李培武,张奇,张文,丁小霞,唐国林,张四奇. 2010

[13]小麦热激蛋白WHSP90基因的原核表达及多克隆抗体制备. 李琳,徐兆师,刘丽,于卓,李连城,陈明,马有志. 2009

[14]鼠伤寒沙门氏菌鞭毛蛋白FliC的原核表达、纯化及其多克隆抗体的制备. 陈明,徐幸莲,周光宏,汤晓艳,袁飞,陈爱亮. 2013

[15]牛病毒性腹泻病毒E0蛋白的表达与多克隆抗体制备. 王雪枝,朱远茂,史鸿飞,严昊,蔡红,王姝,马磊,薛飞. 2014

[16]抗鳞翅目害虫基因cry1C的抗原表位分析及多克隆抗体制备. 金永梅,陈莫军,刘笑笑,林秀峰. 2018

[17]桑树几丁质酶基因Machi1的克隆及原核表达. 肖圣燕,朱峰,冉瑞法,李镇刚,张永红,邵榆岚,唐芬芬,白兴荣. 2019

[18]创伤弧菌外膜蛋白多克隆抗体的制备及其特性分析. 古小莉,李永贤,李惠青,陈洁文,李刘冬. 2017

[19]西藏株小反刍兽疫病毒H蛋白的原核表达及其多克隆抗体的制备. 于瑞嵩,高位相,李凤平,董世娟,李震. 2018

[20]利用hAPOA1原核蛋白生产兔多克隆抗体. 徐志伟,赵杰,刘伟忠,刘照亭,王期. 2016

作者其他论文 更多>>

微信小程序