山羊支原体山羊肺炎亚种MCCG-0521乳酸脱氢酶基因的克隆表达及其编码氨基酸的生物学分析
文献类型: 中文期刊
第一作者: 刘威
作者: 刘威;蒋鹏程;杨克礼;袁芳艳;周丹娜;刘泽文;高婷;郭锐;孙裴;田永祥
作者机构:
关键词: 山羊支原体山羊肺炎亚种;MCCG-0521;乳酸脱氢酶;密码子改造;二级结构
期刊名称: 动物医学进展
ISSN: 1007-5038
年卷期: 2023 年 44 卷 002 期
页码: 35-40
收录情况: 北大核心 ; CSCD
摘要: 旨在获得山羊支原体山羊肺炎亚种MCCG-0521乳酸脱氢酶(L-lactate dehydrogenase,LDH)的蛋白表达产物,分析其编码氨基酸的生物学特性,为进一步研究LD H蛋白的功能奠定基础.试验完成了LDH基因的克隆和密码子改造,成功将LDH基因中473、761、779 nt处的A突变为G,使改造后的LDH基因能在大肠埃希氏菌Rosetta中正确表达.SDS-PAGE电泳结果显示,IPTG诱导目的蛋白表达后获得一条大小约34 ku的蛋白条带,Western blot结果表明获得的原核表达产物可与抗6×His tag的单克隆抗体发生特异性反应,研究采用DNAStar Protean模块分析了LDH的二级结构、蛋白骨架柔性区域和可能的B细胞抗原优势表位,为进一步研究其功能奠定了基础.
分类号: S852.62
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