表达绿色荧光蛋白的坦布苏病毒的构建与鉴定

文献类型： 中文期刊

第一作者： 章丽娇

作者： 章丽娇;田宇杰;张兰香;赵冬敏;韩凯凯;黄欣梅;杨婧;吴凤瑶;刘青涛;刘宇卓;张小飞;李银

作者机构：

关键词： 坦布苏病毒;绿色荧光蛋白;报告病毒

期刊名称： 动物医学进展

ISSN： 1007-5038

年卷期： 2024 年 006 期

页码： 44-50

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 报告病毒在高通量抗病毒药物筛选、活体动物体内成像及新型疫苗研发等方面具有重要应用价值.通过反向遗传操作技术,以坦布苏病毒JXSP株感染性克隆为基础,采用两种策略构建报告病毒,即分别在病毒基因组5′UTR和C蛋白基因、N S5基因和3′UTR间引入外源基因EGFP,通过融合PCR获得全长cDNA PCR产物,体外转录生成mRNA,转染至BHK-21拯救重组病毒并研究其生长特性.结果显示,利用5′UTR-C位点构建的报告病毒mRNA转染BHK-21细胞后能观察到明显的绿色荧光;报告病毒P0接种DEF细胞后可高强度表达绿色荧光蛋白,在BHK-21和DEF细胞上增殖速度略微低于亲本毒株,但差异不显著.结果表明,成功构建了1株坦布苏绿色荧光报告病毒rJXSP-5′EGFP,在BHK-21和DEF细胞上均能有效增殖.

分类号： S852.659.6%Q789

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