猪囊尾蚴cDNA表达文库的免疫筛选

文献类型: 中文期刊

第一作者: 宗瑞谦

作者: 宗瑞谦;景志忠;才学鹏

作者机构:

关键词: 猪囊尾蚴;cDNA表达文库;免疫筛选

期刊名称: 中国兽医科技

ISSN: 1000-6419

年卷期: 2004 年 34 卷 08 期

页码:

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 用质粒表达载体pSPORT 1构建了猪囊尾蚴cDNA文库。将已构建好的cDNA表达文库用SOC按一定比例稀释后 ,均匀涂布于LB板 (Amp+ )上 ,37℃培养箱中倒置培养过夜。将生长良好的菌落转印于NC膜 ,并将此膜置于加有IPTG的LB板上 ,37℃诱导培养 4h。取下NC膜 ,在氯仿蒸气中熏蒸 15min后 ,在裂解液中过夜裂解。经洗膜、封闭 ,加人囊尾蚴阳性血清 ;再洗膜、封闭 ,加羊抗人IgG HRP ,与底物作用后 ,初步筛选得到了阳性克隆。对可疑阳性克隆 ,用同样方法反复筛选 ,直到完全确定为止

分类号: S852.7

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