湖羊胚胎来源成肌细胞的培养方法改良与特性分析

文献类型： 中文期刊

第一作者： 刘璐璐

作者： 刘璐璐;胡文萍;尚明玉;王欣悦;冯勉;刘运辉;熊金珂;张莉

作者机构：

关键词： 湖羊;骨骼肌;成肌细胞

期刊名称： 基因组学与应用生物学

ISSN：

年卷期： 2022 年 007 期

页码： 1440-1451

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 为获得湖羊（Ovis aries）胚胎来源骨骼肌成肌细胞，本研究采集72日龄湖羊胚胎四肢骨骼肌组织，并对现有细胞培养技术进行改良和比较，结合差速贴壁法分离和纯化湖羊骨骼肌成肌细胞，对分离获得的骨骼肌成肌细胞进行鉴定、传代培养及诱导分化等研究。结果表明，本研究采用的改良方法可高效获得湖羊胚胎来源骨骼肌成肌细胞，获得的细胞具有较强的增殖能力，可连续培养30代仍保持正常细胞形态。利用低浓度马血清培养体系，可成功诱导湖羊骨骼肌成肌细胞向肌管分化，同时培养至第10代时肌管数量显著增加。RT-qPCR检测结果表明，骨骼成肌细胞标志性基因PAX7、MYOD、desmin和MYOG均表达，且随传代次数增加表达量逐渐降低；培养至第10代时MYF5基因表达量显著增加。细胞免疫荧光结果表明，第28代骨骼肌成肌细胞标志蛋白横纹肌辅肌动蛋白α（αsarcomeric actin）基因表达。综上所述，本研究采用的改良方法高效可靠，可满足较高纯度湖羊骨骼肌成肌细胞的分离纯化和培养，并为其他动物骨骼肌成肌细胞的分离纯化和培养提供依据和参考。

分类号： S826

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