不同供体细胞及其处理对猪核移植重构胚体外发育的影响

文献类型： 中文期刊

第一作者： 张德福

作者： 张德福;刘东;汤琳琳;王英;陈茵;王凯;王根林;KARL Schellander

作者机构：

关键词： 猪;体细胞核移植;细胞周期

期刊名称： 遗传

ISSN： 0253-9772

年卷期： 2007 年 29 卷 02 期

页码： 211-217

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 系统探讨了体细胞的组织来源及培养代数对猪核移植重构胚发育的影响。体外成熟培养40~44h的猪卵母细胞去核后,将经血清饥饿(0.5%FBS)培养2~9天、0.1mg/LAphidicolin(APD)培养+0.5%FBS培养2~9天或一般培养法(10%FBS)培养的卵丘细胞、颗粒细胞、输卵管上皮细胞和耳皮成纤维细胞,直接注射到去核的卵母细胞质中,或注射到卵周隙中,再经电融合(100V/mm,30μs,电脉冲1次)构建重构胚。重构胚以钙离子载体A23817或电脉冲结合6-DMAP激活处理,体外培养6天。耳皮成纤维细胞和颗粒细胞经0.1mg/LAPD+0.5%FBS培养处理后的重组胚卵裂率,均高于血清饥饿和一般培养处理的同种供体细胞(P<0.01)。卵丘细胞、颗粒细胞经0.1mg/LAPD+0.5%FBS处理后进行核移植的分裂率和发育率均高于输卵管上皮细胞和耳皮成纤维细胞(P<0.05)。以猪颗粒细胞为核供体时,电融合法的重构胚分裂率显著高于胞质内注入法(P<0.05),但囊胚发育率无显著差异(P>0.05)。培养3代和6代的猪颗粒细胞以及培养6代和10代的耳皮成纤维细胞,其具有正常二倍染色体的细胞比例均无显著差异(P>0.05);以这2种细胞不同培养代数做供体进行核移植时,各代之间核移胚的体外分裂率、囊胚发育率无显著差异(P>0.05)。这些结果表明:(1)猪耳皮成纤维细胞和颗粒细胞经培养传代所建立起来的细胞系相对比较稳定;(2)0.1mg/LAPD预培养处理供体细胞能提高猪体细胞核移植的效果,血清饥饿培养则无明显效果;(3)猪颗粒细胞和耳皮成纤维细胞等均可做供核细胞,核移植后都能得到体细胞克隆的囊胚,但前者的效果略优于后者,且其核移植效果不受供核细胞培养代数的影响;(4)电融合核移植胚胎的发育率高于胞质内直接注入法,但两者的总体效率相近。

分类号： Q813

  • 相关文献

[1]体细胞的组织来源及培养代数对猪核移植重构胚发育的影响. 张德福,刘东,汤琳琳,王英,陈茵,王凯,Karl Schellander. 2006

[2]Vero细胞共培养体系对猪胚胎早期发育的影响. 付博,马红,任亮,赵金凤,房庆昌,郭镇华,李忠秋,刘娣. 2010

[3]体内、外卵母细胞对猪体细胞克隆胚胎发育潜力的影响. 华再东,郭帅,肖红卫,任红艳,张立苹,葛耀文. 2017

[4]成年克隆猪肺脏差异蛋白的鉴定与功能分析. 张树山,戴建军,吴彩凤,孙玲伟,韩雪峻,姜红菊,张德福. 2020

[5]初次卯裂时间是猪克隆胚胎发育潜能的重要标识. 罗学明,肖炜,冯冲,龙川,闫军,薛振华,云鹏,潘登科. 2010

[6]放线菌酮处理对猪孤雌激活及体细胞核移植胚胎发育的影响. 马红,付博,赵金凤,李忠秋,房庆昌,仁亮,刘娣. 2011

[7]氧分压、培养基及生长因子对猪体细胞克隆胚胎体外发育的影响. 潘登科,刘吉,冯书堂,牟玉莲,张莉. 2008

[8]成年克隆猪与正常繁殖猪心脏的比较蛋白质组学研究. 张树山,戴建军,吴彩凤,张廷宇,张德福. 2013

[9]猪卵母细胞体外发育系统的优化及转基因体细胞核移植系统的建立. 王慧利,孟春花,张庆晓,李静心,苏磊,贺强,朱前明,曹少先. 2012

[10]用Ala-Gln二肽替换Gln可提高猪体细胞克隆胚胎发育能力. 王旭霞,靳宇洲,左振瑞,刘志国. 2017

[11]初次卵裂时间是猪克隆胚胎发育潜能的重要标识. 罗学明,肖炜,冯冲,龙川,闫军. 2010

[12]初次卵裂时间可作为猪克隆胚胎发育潜能的标识. 罗学明,龙川,朱彦宾,冯冲,闫军,陆芳,严康,潘登科. 2010

[13]季节对猪体外成熟卵母细胞的发育能力的影响. 张坤,张运海,潘登科,马育芳,张建,李旭阳,卫恒习,王少华,李燕,戴蕴平,李宁. 2007

[14]体细胞核移植生产转ω-3脂肪酸去饱和酶基因(sFat-1)的猪胚胎. 冯冲,周艳荣,龙川,刘晓,陈红星,潘登科,杨博辉. 2009

[15]猪体细胞克隆胚胎移植技术要点分析. 吴亚林,李继良,周伟良,董树仁,冯保亮,刘志国,牟玉莲,李奎. 2019

[16]新生死亡克隆猪的组织病理学观察. 陈会兰,戴建军,吴彩凤,张廷宇,张树山,顾晓龙,吴斌. 2014

[17]用Ala-Gln二肽替换Gln可提高猪体细胞克隆胚胎发育能力. 王旭霞,靳宇洲,左振瑞,刘志国. 2016

[18]基于CRISPR/Cas9技术构建猪KLF4基因敲除细胞系及其对细胞活性的影响分析. 董娇,陆繁,方晓敏,陈瑜哲,包文斌,王海飞. 2024

[19]IL-15过表达对猪骨骼肌细胞成肌分化的影响. 邢明杰,顾宪红,王枭鸿,郝月. 2022

[20]Demecolcine化学辅助去核技术在牛体细胞核移植中的初步研究. 沙伟,郭振华,刘赫,殷志明,马红,李仲秋,吴赛辉,刘娣,SHA Wei,GUO Zhen-hua,LIU He,YIN Zhi-ming,MA Hong,LI Zhong-qiu,WU Sai-hui,LIU Di. 2009

作者其他论文 更多>>

微信小程序