鱼源嗜水气单胞菌aopB~-/aopD~-/aroA~-缺失株的构建及鉴定

文献类型： 中文期刊

第一作者： 罗晓松

作者： 罗晓松;尚书;侯化鹏;汪登强;邹世平

作者机构：

关键词： 嗜水气单胞菌;自杀性质粒pRE112;自杀性质粒pSUP202;aopB-/aopD-/aroA-缺失株

期刊名称： 农业生物技术学报

ISSN： 1006-1304

年卷期： 2009 年 17 卷 01 期

页码： 29-35

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila)能引起多种鱼类暴发性出血性败血症,为研制更加安全的嗜水气单胞菌口服活疫苗,构建了鱼源嗜水气单胞菌aopB-/aopD-/aroA-缺失株。首先构建含缺失369 bp的aopB/aopD基因(编码嗜水气单胞菌外膜蛋白B、D)与蔗糖敏感基因(sacB)的重组自杀性质粒pREaopB/aopD,与嗜水气单胞菌Ah2056接合转移,应用二步法筛选aopB-/aopD-缺失株,PCR证实aopB/aopD基因的缺失突变。在此基础上,构建另一个含缺失1 290 bp的aroA基因(编码5-酸烯醇式丙酮酸莽草酸-3-磷酸合酶)与庆大霉素抗性片段(aacC1片段)的重组自杀性质粒pSUParoA,与aopB-/aopD-缺失株接合转移,利用庆大霉素抗性筛选aopB-/aopD-/aroA-缺失株,用PCR证实aroA基因的缺失突变。进一步对aopB-/aopD--/aroA-缺失株进行生长特性、对鱼的毒力等生物学特性鉴定。结果表明,aopB-/aopD-/aroA-缺失株构建成功,且该缺失株为毒力丧失、营养缺陷株。

分类号： S941

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