SUMO基因的内在原核启动子活性及其在大肠杆菌蛋白表达系统中的应用

文献类型： 中文期刊

第一作者： 亓燕红

作者： 亓燕红;邹竹荣;邹华英;范云六;张春义

作者机构：

关键词： SUMO基因;原核启动子;SUMO融合系统;共表达;大肠杆菌

期刊名称： 生物工程学报

ISSN： 1000-3061

年卷期： 2011 年 27 卷 06 期

页码： 130-140

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： SUMO融合系统已成为目前大肠杆菌重组蛋白生产的重要手段,但在载体构建效率和蛋白可溶性等方面仍有待改进。本研究在PCR克隆酿酒酵母SUMO基因Smt3(Sm)时意外发现Sm具有组成型原核启动子活性;而且经软莓BPROM程序预测发现大多数物种SUMO基因编码区都具有依赖σ70的原核启动子。进一步通过整合Sm启动子和Sm 3′末端StuⅠ位点特性以及引入His标签和超酸增溶标签,构建了基于Sm’-LacZα融合基因的一系列通用克隆表达载体,并通过蓝白斑筛选和SDS-PAGE分析进行了多个靶蛋白基因的克隆和表达,结果表明实现了基因表达载体的快速构建、蛋白高可溶性表达和关联蛋白的共表达等目标。因此,集成诸多特性而改良的SUMO融合技术可以成为大肠杆菌蛋白表达系统的有力工具,建立的共表达载体系统还可以用作研究细胞内蛋白间的相互作用。

分类号： Q78

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