人组织型纤溶酶原激活剂(t-PA)(1354-1802)的原核表达及抗血清制备

文献类型： 中文期刊

第一作者： 王青泉

作者： 王青泉;武建明;李秀梅;王立群;何洪彬;王洪梅;刘晓

作者机构：

关键词： t-PA;原核表达;抗血清

期刊名称： 安徽农业科学

ISSN： 0517-6611

年卷期： 2012 年 40 卷 16 期

页码： 123-125

收录情况： 北大核心

摘要： [目的]制备人组织型纤溶酶原激活剂t-PA(1354-1802)抗血清,并测定其效价,为深入研究t-PA基因功能奠定基础。[方法]利用基因克隆技术获得t-PA(1354-1802)催化域基因片段,然后将其重组到pET-32a(+)质粒中,进行鉴定及序列分析;将测序正确的阳性质粒转化大肠杆菌BL21感受态细胞,IPTG诱导、蛋白纯化及免疫兔试验。[结果]SDS-PAGE结果显示,37 kD处出现特异性条带;对该融合蛋白进行分离纯化后免疫新西兰兔,制备t-PA蛋白抗血清,Western blot分析表明,抗血清可与标准品t-PA蛋白特异性结合,间接ELISA方法检测抗血清的效价可达到1∶12 800。[结论]成功制备了t-PA(1354-1802)抗血清,为t-PA基因功能的深入研究奠定了基础。

分类号： R543

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