玉米赤霉烯酮降解酶多拷贝毕赤酵母菌株的构建及高效表达

文献类型： 中文期刊

第一作者： 王义春

作者： 王义春;王龑;江均平;赵月菊;邢福国;周露

作者机构：

关键词： 玉米赤霉烯酮;降解;zlhy-6;高效表达;多拷贝;毕赤酵母

期刊名称： 生物工程学报

ISSN： 1000-3061

年卷期： 2020 年 02 期

页码： 372-380

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 通过密码子优化、体外多拷贝构建实现玉米赤霉烯酮(Zearalenone,ZEN)降解酶基因(zlhy-6)在毕赤酵母GS115菌株中的高效表达。按酵母密码子偏好性优化zlhy-6基因的密码子,与α因子信号肽编码序列一起合成,插入到pAO815质粒中,通过酶切酶连构建含1–6个表达盒的表达质粒,将其转入毕赤酵母GS115菌中,获得ZEN降解酶重组菌株。重组蛋白分子量为28.9 kDa,与预期一致。重组菌用甲醇诱导3 d,蛋白浓度达最高,之后下降;在pH 5.0、4.5条件下诱导培养,表达量最高;每天添加0.8%的甲醇、接种量10%表达水平最高;4拷贝的转化子表达水平最高,三角瓶发酵3 d,酶活性达到10 U/mL。在1 g玉米渣中添加0.1–0.5 mL发酵上清液,水解24 h,玉米渣中ZEN的降解率为44.08%–75.51%。研究结果为ZEN降解酶工业生产及在食品饲料中的应用奠定了基础。

分类号： Q78`Q55

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