胸膜肺炎放线杆菌体内表达基因的筛选

文献类型： 中文期刊

第一作者： 刘慧芳

作者： 刘慧芳;刘思国;王春来;司微;王聃;杜艳芬;赵海玲;赫明雷

作者机构：

关键词： 胸膜肺炎放线杆菌;体内诱导抗原技术;菌落原位免疫杂交

期刊名称： 中国兽医科学

ISSN： 1673-4696

年卷期： 2008 年 38 卷 10 期

页码： 847-850

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 利用体内诱导抗原技术对胸膜肺炎放线杆菌(APP)体内表达的基因进行了初步筛选。将收集到的5份感染了APP1型的猪血清混合,分别用体外培养的APP1和大肠杆菌BL21(DE3)的全菌及全菌裂解物进行吸附,用ELISA方法检测吸附效果,经吸附后血清D450 nm分别由原来的0.927和0.239降低为0.196和0.078。同时,将APP1基因组DNA以Bsp143Ⅰ进行酶切,回收500~2 000 bp的片段,与pET30a/b/c载体连接,构建了APP1基因组质粒表达文库,库容量(CFU)为2.0×105。用吸附后的血清通过菌落原位免疫杂交筛选该基因组表达文库,从3 000个菌落中获得了12个阳性克隆。

分类号： S852.619

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