文献类型： 中文期刊
第一作者： 温立斌
作者： 温立斌;何孔旺;杨汉春;郭容利;周俊明;钟书霖
作者机构：
关键词： 类猪圆环病毒因子;P1;荧光定量PCR;熔解曲线;检测
期刊名称： 华北农学报
ISSN： 1000-7091
年卷期： 2009 年 24 卷 04 期
页码： 31-35
收录情况： 北大核心 ; CSCD
摘要： 该研究旨在建立快速、敏感和特异的检测类猪圆环病毒因子P1的SYBR Green Ⅰ荧光定量PCR法,用于P1的早期诊断。以感染P1的猪血清DNA提取物为模板,采用PCR扩增P1 101 bp的基因片段,将其克隆至pMD18-T载体,重组质粒测序并进行同源性分析;以阳性质粒为模板,建立SYBR Green Ⅰ荧光定量PCR检测方法,并进行敏感性和特异性检测。经测序证实扩增片段属于P1,所建立的SYBR Green Ⅰ荧光定量PCR检测P1的反应在101~108拷贝/μL之间具有良好的线性关系,反应的检出下限为10拷贝/μL,而对猪伪狂犬病病毒、猪细小病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒等的检测为阴性,表明该方法敏感、特异。成功建立了SYBR Green Ⅰ荧光定量PCR检测P1载量的方法,为P1致病机制和机体免疫保护机制的研究提供了技术平台。
分类号： S852.65
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