小菜蛾蛋白质提取方法的比较

文献类型: 中文期刊

第一作者: 王筱翔

作者: 王筱翔;林庆胜;尹飞;胡珍娣;陈焕瑜;沈斌斌;陈小帆;冯夏

作者机构:

关键词: 小菜蛾;蛋白质;提取;蛋白质组学;聚丙烯酰胺凝胶电泳

期刊名称: 环境昆虫学报

ISSN: 1674-0858

年卷期: 2015 年 37 卷 01 期

页码: 56-60

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 建立适用于小菜蛾蛋白质组学研究的样品前处理方法。应用SDS-PAGE电泳比较分析了TCA-丙酮沉淀,Tris-饱和酚抽提,RIPA Lysis Buffer和I-PER Reagent直接裂解4种方法对小菜蛾幼虫总蛋白的抽提质量。结果显示:4种方法对小菜蛾全蛋白的提取率差异比较显著,其中RIPA Lysis Buffer和I-PER Reagent两种直接裂解法蛋白提取率最高,分别为52.06 mg/g和46.16 mg/g;TCA-丙酮沉淀法提取率适中,为34.58 mg/g;Tris-饱和酚抽提法提取率最低,为27.39 mg/g。SDS-PAGE电泳分析表明,Tris-饱和酚抽提法蛋白谱条带分辨率最高,蛋白条带最多,为32条,在17.0 k Da-245 k Da的范围内分布均匀;TCA-丙酮沉淀法蛋白谱带数目为30条,条带清晰,分辨率较高,但缺失部分蛋白;RIPA Lysis Buffer和I-PER Reagent两种直接裂解法蛋白谱条带数目较少,小分子蛋白条带丢失或不明显。根据蛋白提取率和条带的数量综合分析,TCA-丙酮沉淀法适用于小菜蛾蛋白质组学的样品前处理。

分类号: S433.4

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