稳定表达猪繁殖与呼吸综合征病毒受体CD163的HEK293细胞系的建立

文献类型： 中文期刊

第一作者： 牛军伟

作者： 牛军伟;郭龙军;谷伟红;黄明明;李忍;骆晓蕾;王玉娥

作者机构：

关键词： 猪繁殖与呼吸综合症病毒;CD163;稳定表达;HEK293细胞系

期刊名称： 中国预防兽医学报

ISSN： 1008-0589

年卷期： 2015 年 37 卷 03 期

页码： 163-166

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 为构建稳定表达猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)受体CD163的HEK293细胞系,本研究采用RT-PCR方法从猪肺泡巨噬细胞(PAM)总RNA中扩增CD163基因并将其克隆至真核表达载体pc DNA3.1(+)中,构建重组质粒pc DNA-CD163。将该重组质粒转染HEK293细胞,并利用G418筛选、纯化,获得了稳定表达CD163受体蛋白的HEK293CD163细胞系。RT-PCR、流式细胞术及western blot检测结果表明,该细胞系在传代至15代后,CD163在HEK293细胞中仍然能够稳定表达。在该细胞系中接种PRRSV后进行间接免疫荧光及噬斑试验检测表明,病毒能够通过CD163感染HEK293CD163细胞并在其中增殖。该细胞系的建立为进一步研究PRRSV的侵入细胞和致病机制提供了病毒在体外增殖的易感细胞系。

分类号： S852.651

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