文献类型： 中文期刊
第一作者： 杨鸣发
作者： 杨鸣发;马云云;于志亚;刘家森;康洪涛;姜骞;曲连东
作者机构：
关键词： 小反刍兽疫病毒（PPRV）;芯片式数字PCR（cdPCR）;实时荧光定量PCR（RT-qPCR）
期刊名称： 中国动物检疫
ISSN： 1005-944X
年卷期： 2021 年 012 期
页码： 91-98
摘要： 为建立一种准确、快速、敏感性更高的小反刍兽疫病毒（peste des petits ruminants virus,PPRV）检测方法,建立了一种芯片式数字PCR（cdPCR）检测方法。根据GenBank中公布的PPRV Nigeria75/1疫苗株N基因序列设计1对引物,PCR扩增大小为166 bp片段,构建pMDTM18-N标准质粒并优化反应条件,建立了PPRV N基因cdPCR检测方法,并与实时荧光定量PCR（RT-qPCR）检测方法的灵敏性、重复性、特异性和临床样品检测做了比较分析。结果显示:当质粒标准品浓度在1.22×（105～102）copies/μL范围时,cdPCR检测方法比普通RT-PCR灵敏度高1 000倍,且稳定性好,特异性强;当标准品浓度在1.22×(105～10-3)copies/μL范围时,cdPCR与RT-qPCR相比具有相同的特异性,但灵敏性比RT-qPCR高100倍;与RT-qPCR测定结果（13.29±6.74）copies/μL相比,cdPCR的最低检测限更低,约为（0.44±0.14）copies/μL;cdPCR对47份临床样本的PPRV核酸阳性检出率（25.5%）高于RT-qPCR（17.0%）。结果表明,建立的cdPCR方法特异性强、灵敏度高、重复性好,为预防PPR早期流行提供了一种快速有效的诊断和定量检测方法。
分类号： S852.65
- 相关文献
作者其他论文 更多>>
-
SPF鸡育雏期加热方式的选择
作者：张伟;于海波;杨鸣发;王园园;李昌文;夏长友
关键词：SPF鸡;育雏;加热方式
-
基于大肠杆菌表达系统高效生产外源蛋白的自诱导培养基的研发
作者：侯茁;邵军军;刘伟;高闪电;彭德财;宁小雨;马云云;温升辉;常惠芸
关键词：大肠杆菌;表达;自诱导培养基;乳糖
-
O型口蹄疫病毒CATHAY株持续感染BHK21细胞系的建立
作者：彭德财;刘伟;高闪电;马云云;温升辉;侯茁;师铭咸;邵军军;常惠芸;丁嘉烽
关键词：口蹄疫病毒;持续感染细胞系;BHK21;利巴韦林;氯化铵;免疫阳性血清
-
猫疱疹病毒Ⅰ型RAA检测方法的建立与应用
作者：王颖;戚睿斌;崔赛赛;杨育鹏;冯可昕;刘家森;姜骞;杨鸣发;康洪涛;曲连东
关键词：猫疱疹病毒;重组酶介导等温扩增;快速检测方法
-
兔多杀性巴氏杆菌和兔出血症病毒双重PCR检测方法的建立及初步应用
作者：王豪杰;陈见兴;王梦杰;林欢;夏长友;刘家森;陈洪岩;朱良全;张贺;王玉娥
关键词：多杀性巴氏杆菌;兔出血症病毒;双重PCR
-
一株猫疱疹病毒Ⅰ型的分离与鉴定
作者：许鑫燕;郑亚婷;刘迪;马波;刘家森;曲连东
关键词：猫疱疹病毒;猫杯状病毒;分离;鉴定
-
杯状病毒疫苗免疫猫中杯状病毒分离株的遗传变异分析
作者：郑亚婷;刘迪;许鑫燕;杨育鹏;康洪涛;姜骞;杨鸣发;刘家森;曲连东
关键词：猫杯状病毒;疫苗;全基因组;遗传进化
