大豆持绿基因GmSGR的RNA干扰载体构建及遗传转化

文献类型： 中文期刊

第一作者： 刘阳颖

作者： 刘阳颖;高乐;韩俊;李润枝;康恩宽;韩天富;谢皓;王程

作者机构：

关键词： 大豆;持绿基因;基因克隆;RNA干扰载体;遗传转化

期刊名称： 分子植物育种

ISSN： 1672-416X

年卷期： 2018 年 17 期

页码： 5616-5623

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 持绿基因(Stay Green gene)在植物衰老过程中起到了重要的作用。本研究利用同源序列PCR方法、Gateway重组技术和子叶节遗传转化方法,对大豆持绿基因Gm SGR进行RNAi载体的构建,并将其转入到大豆受体中,获得转基因阳性植株。结果显示,分别获得长度为786 bp的Gm SGR1 CDS序列,长度为816 bp的Gm SGR2 CDS序列及355 bp的att B-Gm SGRi干扰片段。依据RNAi引物设计原则和Gateway重组技术,将干扰片段依次导入到入门载体p DONR221和表达载体p B7GWIW2(Ⅱ)中,并转化农杆菌EHA105,通过子叶节法将其转入大豆受体中,最终获得阳性转基因植株。本研究在m RNA水平沉默同源靶基因,干扰大豆Gm SGR基因功能,结果显示其叶片和种子有趋向持绿的特性。本研究为探究持绿基因的遗传效应,作用机理提供实践参考,为高光效大豆的遗传改良,探讨植物衰老延缓机制,提高产量和品质等提供理论支持。

分类号： S565.1

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