紫花苜蓿MsLEA4-4基因的克隆、表达分析及遗传转化

文献类型： 中文期刊

第一作者： 贾会丽

作者： 贾会丽;王学敏;郭继承;高洪文;吴欣明;刘建宁;石永红;董宽虎;王运琦

作者机构：

关键词： 紫花苜蓿;胚胎晚期富集蛋白(LEA);逆境胁迫;遗传转化

期刊名称： 草业学报

ISSN： 1004-5759

年卷期： 2017 年 12 期

页码： 108-116

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 胚胎晚期富集蛋白(LEA)广泛参与植物对多种逆境胁迫的反应。本研究利用同源克隆的方法,从紫花苜蓿中克隆了一个LEA4类基因的开放阅读框(ORF),命名为Ms LEA4-4。该基因编码512个氨基酸,结构分析显示MsLEA4-4包含5个重复的由11个氨基酸TAQAAKEKTQQ组成的序列特征。利用实时荧光定量PCR检测了Ms LEA4-4在不同逆境下的表达量,结果显示,该基因受干旱、NaCl、Cu~(2+)、Zn~(2+)和外源ABA诱导表达上调,其中Na Cl胁迫2h、Cu2+和Zn2+胁迫8 h,Ms LEA4-4基因表达量最高;冷胁迫和干旱胁迫下,该基因的表达量随处理时间的延长呈逐渐上升趋势,表明该基因可能参与了紫花苜蓿的抗逆性调控。构建植物超表达载体p CAMBIA3301-Ms LEA4-4,采用农杆菌介导法侵染拟南芥花序,通过草铵膦(PPT)筛选和分子检测,7株抗性苗呈阳性,表明目的基因已成功导入拟南芥基因组中。本研究为进一步探索Ms LEA4-4基因在紫花苜蓿抗逆性调控中的作用奠定了基础。

分类号： S541.9

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