大花蕙兰基因组DNA提取及RAPD反应条件探索

文献类型： 中文期刊

第一作者： 李冬梅

作者： 李冬梅;朱根发;叶庆生

作者机构：

关键词： 大花蕙兰;基因组DNA提取;CTAB;RAPD

期刊名称： 热带亚热带植物学报

ISSN： 1005-3395

年卷期： 2006 年 14 卷 01 期

页码： 25-30

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 用SDS、CTAB和改良CTAB法分别提取大花蕙兰叶片基因组DNA,发现以改良CTAB法提取的DNA纯度高,产率也较高。以5’-GGTGCTCCGT-3(’BA440)为随机引物,并以大花蕙兰品‘种金杯(’Cymbidiumhybridiumcv.HiroshimaGoldenCu“pSunnyMoon”)的DNA为模板,对RAPD(RandomAmplifiedPolymorphicDNA)反应体系进行了优化研究,结果表明,25μl反应体系中,Mg2+、TaqDNA聚合酶、引物、模板DNA和dNTP5种主要成分的适宜浓度或用量分别是:2.0mmol/L、1.0U、0.20μmol/L、25ng和0.20mmol/L。扩增程序优化为:94℃预变性4min;94℃变性0.5min,37℃退火1min,72℃延伸1min,40个循环;最后72℃延伸7min。

分类号： S682.31

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