五种烟草根茎病害病原菌多重PCR检测方法的建立与应用

文献类型： 中文期刊

第一作者： 李小杰

作者： 李小杰;张梦丹;刘畅;苗圃;白静科;邱睿;陈玉国;刘剑君;李淑君

作者机构：

关键词： 烟草;根茎病害;多重PCR;灵敏性;病害检测

期刊名称： 中国烟草科学

ISSN： 1007-5119

年卷期： 2024 年 003 期

页码： 60-67

收录情况： CSCD

摘要： 为了快速准确鉴别烟草根腐病菌（Fusarium oxysporum）、黑胫病菌（Phytophthora nicotianae）、立枯病菌（Rhizoctonia solani）、根黑腐病菌（Thielaviopsis basicola）和鸢尾丝囊霉菌（Aphanomyces iridis）等5种烟草根茎病害病原菌，利用RAPD分子标记等方法筛选和设计特异性扩增引物，优化多重PCR扩增体系中各引物添加量、退火温度、循环数等条件，建立多重PCR检测体系，并对其检测的可行性进行验证。本研究筛选并设计出F. oxysporum、P. nicotianae、R. solani、T. basicola和A. iridis的特异性引物对LD141 F/R、YM1002 F/R、LK111 F/R、GHFT F/R、AiT7 F/R,PCR反应体系中最佳引物组合浓度分别为1.0、1.0、0.2、0.5、0.5μmol/L，最适退火温度为54℃，最佳循环数为28，可同时扩增出大小分别为370、240、536、783、138 bp的特异性片段，能同时检出5种病原菌DNA的最低限值为0.5 ng/μL，可实现对烟草育苗基质和烟株中5种病原菌的快速检测，对烟草苗期根茎病害的早期预防具有重要意义。

分类号： S435.72

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